Benturan pertama membuat ambulans bergerak ke arah kanan. Ambulans kemudian menabrak Toyota Innova G 1480 BK yang melaju di lajur kanan.
Pada saat bersamaan, roda cadangan truk Hino terlepas akibat benturan. Roda tersebut kemudian menghantam bagian depan Toyota Avanza B 2058 UOR yang berada di belakang ambulans.
Rangkaian tabrakan tersebut mengakibatkan tiga orang di dalam ambulans tewas. Ketiganya, yakni Giyati (42) dan Mulyana (50), pasangan suami istri (pasutri) warga Cengkareng Timur, serta Tekad Susanto (46) kru ambulans asal Tangerang.
Giyati dan Mulyana diketahui sedang dalam perjalanan untuk mengantarkan jenazah anak mereka, Tyo Prasetyo, ke Jepara. Namun, perjalanan tersebut berakhir tragis setelah ambulans yang mereka tumpangi mengalami kecelakaan.
Jenazah ketiga korban kemudian dievakuasi dan dibawa ke RSI Muhammadiyah Weleri, Kendal. Tangis keluarga pecah saat jenazah Giyati dan Mulyana dipindahkan ke mobil jenazah.