Mukesh Ambani merupakan lulusan Universitas Bombay jurusan teknik dan melanjutkan kuliah di Stanford University Amerika Serikat (AS). Namun, dia tidak menyelesaikan kuliahnya tersebut karena diminta segera bergabung di perusahaan ayahnya, Reliance.
Mendiang ayahnya, Dhirubhai Ambani mendirikan Reliance pada tahun 1966 sebagai produsen tekstil kecil. Setelah ayahnya meninggal pada tahun 2002, Mukesh dan adiknya Anil membagi perusahaan keluarga.
Mukesh fokus pada divisi migas, petrokimia, dan tekstil sementara adiknya, Anil memegang bisnis konstruksi, telekomunikasi, hiburan, kelistrikan, dan manajemen aset.
Kini Mukesh Ambani memimpin dan menjalankan Reliance Industries dengan lini bisnis pada bidang petrokimia, minyak dan gas, telekomunikasi, ritel, dan jasa keuangan. Layanan telekomunikasi dan broadband, Reliance Jio memiliki lebih dari 470 juta pelanggan.
Orang terkaya ke-11 di dunia ini juga mengubah Reliance menjadi perusahaan energi ramah lingkungan. Perusahaan ini akan menginvestasikan 80 miliar dolar AS selama 10-15 tahun ke depan pada energi terbarukan dan membangun kompleks baru di sebelah kilangnya.
Ketiga anak Ambani bergabung dengan dewan Reliance pada tahun 2023. Akash mengepalai Jio, Isha mengawasi layanan ritel dan keuangan, dan dan putra bungsunya, Anant berkecimpung dalam bisnis energi.